185 مواد و روش‌ها جهت انجام اين تحقيق، نمونه بردارى در دو بخش مختلف به عمل آمد:1- نمونه بردارى از محيط2- نمونه بردارى از افراد داوطلب. محل نمونه بردارى از محيط، اقامتگاه زائران در شهرهاى مكه و مدينه و نيز چادرهاى محل اقامت اين افراد در مناطق منا و عرفات بود. نمونه بردارى از محيط در دو بخش نمونه بردارى از هوا و سطوح به عمل آمد. جمع آورى نمونه در مكه و مدينه در يك نوبت، ولى در مناطق منا و عرفات با توجه به وضعيّت خاص محيطى و بيابانى بودن منطقه و استفاده از چادر جهت اسكان حجاج، در دو نوبت قبل و بعد از ساكن شدن افراد انجام شد. جهت نمونه بردارى از هوا از روش پليت باز استفاده شد و بدين منظور پليت‌هاى محتوى محيطهاى كشت سابورودكسترو آگار ( S( و برين هارت اينفوژن آگار ( BHI( به مدت ده دقيقه در ارتفاع يك مترى از سطح زمين قرار داده شدند. سپس با گذاشتن درپوش، پليت‌هاى مزبور در دماى محيط و 37 درجۀ سانتى گراد (به ترتيب براى محيطهاى S و BHI( نگهدارى شده و روزانه از نظر رشد كلنى‌هاى قارچى كنترل و بررسى گرديدند. لازم به ذكر است كه جهت دقت در انجام آزمايش‌ها، تمامى پليت‌هاى مورد استفاده در اين مطالعه، ابتدا به مدت 24 ساعت در دماى 37 درجۀ سانتى گراد قرار داده شده، بعد از اطمينان از عدم آلودگى، براى نمونه بردارى به كار رفتند. ضمناً به منظور كم كردن خطاى نمونه بردارى، پليت گذارى در هر مكان به صورت سرى دوتائى براى فضاى به اندازه تقريبى 3*3*2 متر صورت گرفت. براى نمونه بردارى از سطوح، از سواب و موكت استريل استفاده شد و از سطوح مختلف مانند كف، ديوار، پنجره و وسايل گوناگون داخل اتاق‌ها و همينطور سطوح داخلى و درزهاى چادرها و وسايل موجود در آن‌ها نمونه بردارى گرديد. نمونه بردارى از كف و ديوارهاى اتاق‌ها، با استفاده از روش موكت انجام